ICSI - Intracytoplazmatická injekcia spermií

všeobecnosť

ICSI (intracytoplazmatická injekcia spermií) je lekársky asistovaná prokreatívna (PMA) technika, ktorá zahŕňa insemináciu oocytu mikroinjekciou jednej spermie priamo do nej.

V tejto praxi sa gamety (oocyt a spermatozoon) stretávajú mimo ženského tela, takže sa oplodnenie a tvorba jedného alebo viacerých embryí uskutočňuje "v skúmavke" (presnejšie na kultivačnej platni) namiesto všetkých vnútri vajíčkovodu pacienta.

Následne sa embryá prenesú do maternice, kde dochádza k implantácii, čo môže viesť k tehotenstvu.

Metóda ICSI všeobecne zahŕňa farmakologickú stimuláciu vaječníkov na produkciu viac oocytov, po ktorej nasleduje chirurgické odstránenie toho istého (to je malý zásah nazývaný pick-up ); zhromažďovanie mužských gamét sa môže vykonávať namiesto toho masturbáciou, perkutánnou alebo testikulárnou biopsiou.

V laboratóriu sa odoberané samičky gamet umiestnia na kultivačné platne vo vnútri inkubátorov, potom sa jednotlivé spermie naočkujú mikropipetou priamo do cytoplazmy oocytov.

Ak sa oocyty úspešne oplodnia, embryá sa prenesú do maternice transvaginálnou, ultrazvukovou alebo hysteroskopickou liečbou v priebehu 48 až 72 hodín.

Očakávanie ICSI sa očakáva až po tom, čo lekár centra PMA vylúčil možnosť prirodzeného počatia. Táto technika je indikovaná najmä v prípadoch, keď je prítomná silná mužská neplodnosť ; ICSI v skutočnosti umožňuje prekonať ťažkosti oplodnenia, pretože jediná spermatozoon sa vkladá priamo do cytoplazmy oocytov.

Úvodné poznámky 1. \ T

Lekársky podporované rozmnožovanie (PMA) pomáha párom, ktoré chcú mať dieťa, ale nemôžu spontánne podstúpiť tehotenstvo. Túto možnosť lekári označujú ako súčasť liečebnej cesty, v prípadoch, keď sa zistí neplodnosť aspoň jedného z dvoch partnerov a neexistujú iné účinné terapeutické metódy na vyriešenie tohto stavu.
Svetová zdravotnícka organizácia (WHO) definuje neplodnosť ako „neschopnosť otehotnieť v páre po 12-24 mesiacoch nechránených cielených vzťahov “ (to znamená, že je to počas dní pravdepodobnej ovulácie).
Asistované oplodnenie využíva rôzne jednoduché alebo zložité techniky, ktoré zahŕňajú manipuláciu so ženskými gametami (oocyty), samcami (spermie) alebo embryami. Medzi metódy prvej úrovne patrí hormonálna stimulácia, ultrazvukové monitorovanie ovulácie žien a intrauterinná inseminácia (IUI); ten sa vyznačuje tým, že hnojenie prebieha priamo v ženskom genitálnom aparáte. Na druhej strane komplexná liečba druhej a tretej úrovne vyžaduje, aby sa hnojenie uskutočňovalo najskôr in vitro a zahŕňalo: IVF (in vitro fertilizáciu s transferom embrya), ICSI a GIFT (intratubarial transfer gametes). Tieto postupy sú indikované, keď je neplodnosť, ktorá sa má riešiť, závažná a vyžaduje invazívnejšie metódy, ktoré vyžadujú lokálnu anestéziu a / alebo hlbokú sedáciu.

indikácia

Príčiny, ktoré môžu určiť neplodnosť, sú mnohé a môžu závisieť od jedného alebo oboch partnerov.

Zvyčajne sa technika ICSI odporúča v prípadoch:

Tubálne faktory : vajíčkovody (dva kanály, ktoré spájajú vaječníky s maternicou) môžu byť z rôznych dôvodov blokované alebo poškodené; toto bráni počatiu (to je stretnutie semennej tekutiny s vaječnou bunkou) alebo zostup oplodneného vajíčka do maternice pre implantát. Tubálne lézie často závisia od zanedbaných sexuálnych infekcií (ako napríklad chlamydia), ale môžu pochádzať aj z vrodených ochorení, panvovej chirurgie alebo predchádzajúceho mimomaternicového tehotenstva .
Mužská neplodnosť závažného stupňa : môže byť výsledkom rôznych stavov, ktoré ohrozujú produkciu alebo kvalitu semennej tekutiny, ako je varikokéla (kŕčová dilatácia žíl šrotu), kryptorchizmus (zlyhanie alebo neúplný zostup semenníkov v skríženom vaku) a hormonálne deficity (napr. hypogonadotropný hypogonadizmus). Iné príčiny môžu zahŕňať: chronické infekcie, ktoré spôsobujú abnormálnu semennú tekutinu alebo spôsobujú čiastočné alebo úplné uzavretie vas deferénov, genetické abnormality a imunologické faktory (produkcia protilátok proti spermiám mužského organizmu alebo partnera).
Zlyhanie terapeutického postupu techník prvej úrovne, tj keď lekársko-chirurgická liečba alebo vnútromaternicové inseminácie nedali výsledky;
Zmeškané alebo znížené oplodnenie v predchádzajúcich IVF cykloch (IVF).

Medzi ďalšie podmienky, ktoré sú potrebné pre ICSI, patria:

Nevysvetliteľná sterilita (to znamená, že nemôžete zistiť zistenú príčinu), ak predchádzajúca liečba (napr. Inseminačné cykly) nedala výsledky alebo nebola posúdená ako nevhodná;
Obštrukčná azoospermia (neprítomnosť spermií v semennej tekutine v dôsledku prekážok, ktoré bránia jej emisii s ejakuláciou) a sekrécia (nedostatočná tvorba spermií v semenníkoch);
Znížená rezerva vaječníkov : nízky počet oocytov vo vaječníkoch v dôsledku zlepšenia veku ženy alebo v dôsledku vrodených alebo chirurgických príčin;
Endokrinno-ovulačná neplodnosť : vaječníky neprodukujú oocyty v dôsledku príčin hormonálneho pôvodu;
Endometrióza : abnormálny rast tkaniva podobný tomu, ktorý normálne pokrýva vnútro maternice (endometrium) v iných miestach; tento stav môže spôsobiť neplodnosť, pretože často spôsobuje zrasty vaječníkov alebo vajíčkovodov.
Faktory neplodnosti mužského aj ženského pohlavia : súčasne existuje niekoľko príčin, ktoré ovplyvňujú počatie.

Predbežné lekárske vyšetrenia

Keď sa pár napriek progresívnemu pohlavnému styku nestihne rozmnožovať, môže byť počas 12-24 mesiacov indikované lekárske vyšetrenie zamerané na overenie neplodnosti aspoň jedného z partnerov.

Lekár sa v prvom rade stretne s dvomi pacientmi a vypracuje lekársku anamnézu na základe ich lekárskej anamnézy, potom zistí, či existujú faktory, ktoré ovplyvňujú plodnosť (napr. Sexuálne infekcie, nadmerná obezita alebo chudoba, protinádorová liečba, fajčenie, nadmerné požívanie alkoholu). atď.) a odporúča najvhodnejší terapeutický postup na riešenie reprodukčného problému.

Ak sa zistené stavy nedajú zvládnuť inými adekvátnymi farmakologickými a / alebo chirurgickými zákrokmi, potom ak nie je plodenie možné alebo v každom prípade pravdepodobnosť začiatku tehotenstva je vzdialená (ako napríklad v prípade skúmaviek, ktoré nie sú viditeľné alebo poškodené, spermie, s hodnotami deficitu atď.), lekári poukazujú na použitie lekársky asistovanej tvorby. Prijatý postup sa zvyčajne volí na základe príčiny neplodnosti, ktorú predložil pár.

Diagnostická cesta na zistenie neplodnosti

V závislosti od profilu páru môže špecialista PMA centra odporučiť špecifické testy na vylúčenie prítomnosti hormonálnych dysfunkcií, patológií postihujúcich maternicu a trubíc, abnormalít semennej tekutiny a podobne.

Pre pár

Hormonálne dávky (hodnotíme hladiny pohlavných hormónov prítomných v krvi, vylúčime dysfunkcie);
Genetické vyšetrenia (na posúdenie možných anomálií);
Imunologické testy na prítomnosť protilátok proti spermiám.

Pre toho muža

Spermiogramma (vyšetrenie semennej tekutiny na posúdenie jej fertilizačnej kapacity a ďalších základných funkcií, ako je počet, morfológia a percento pohyblivých spermií);
Spermiokultúra (analýza spermií na posúdenie prítomnosti infekčných agensov v pohlavných orgánoch).

Pre ženu

Hysterosalpingografia (na kontrolu stavu skúmaviek a ich priechodnosti);
Ultrazvuk maternice a vaječníkov (umožňuje kontrolovať ovuláciu, množstvo oocytov, prítomnosť možných cyst, myómov alebo iných formácií);
Hysteroskopia (endoskopické vyšetrenie dutiny maternice);
Pap test (cytologické vyšetrenie, ktoré skúma prítomnosť HPV lézie a zmeny buniek na úrovni krčka maternice);
Vyhľadávanie infekčných agensov (napr. Vaginálny výter na detekciu bežných patogénov, ako sú Chlamydia a Candida ).

Ako sa to robí?

Metóda ICSI sa používa spolu s IVF, s tým rozdielom, že metóda oplodnenia oocytu sa uskutočňuje injekciou jedinej spermatozy do cytoplazmy.

Aj v tomto prípade sa preto stretnutie gamét uskutočňuje mimo tela ženy (tj na kultivačnej platni). Po úspešnom oplodnení sa potom embryá prenesú do maternice.

Získanie oocytov

ICSI je možné vykonať:

V spontánnom cykle (teda bez akejkoľvek terapie ovariálnej stimulácie);
S farmakologickou stimuláciou ovulácie, ktorá má za následok zrenie viacerých oocytov, tj s indukciou rastu folikulov pri súčasnej produkcii viacerých ženských gamét podávaním liekov (denné dávky).

V druhom prípade sa ovariálna odpoveď kontroluje:

Monitorovanie ultrazvukom : séria ultrazvukových vyšetrení sa vykonáva približne každé dva dni, aby sa pozoroval rast folikulov, z ktorých budú pochádzať oocyty;
Hormonálne dávkovanie : na stanovenie sekrécie hormónov spojených s rastom folikulov vo vaječníkoch sa odoberajú vzorky krvi.

Chirurgický odber oocytov a zber spermií

Po stimulácii vaječníkov na produkciu viacerých folikulov sa odber oocytov (odber) uskutočňuje transvaginálnym postupom v lokálnej anestézii a / alebo hlbokom sedácii. Pod kontrolou ultrazvuku, folikuly sú "body" s ihlou a vajcia je nasávaný do nich. V technike ICSI trvá vpich a aspiračná procedúra v priemere od 5 do 15 minút, v závislosti od počtu prítomných folikulov.

Spermie sa zbierajú masturbáciou po 2 - 3 dňoch abstinencie ejakulácie, v ten istý deň ako odber vajíčok. V niektorých prípadoch sa odber mužských gamét vykonáva perkutánne alebo testikulárnou biopsiou.

Hnojenie zozbieraných oocytov prebieha v ten istý deň odberu.

Hnojenie oocytov v laboratóriu

Folikulárna kvapalina sa analyzuje pod mikroskopom, aby sa izolovali oocyty, ktoré sa prenesú do špeciálnej kultivačnej kvapaliny a uskladnia v inkubátore. Zároveň sa pripraví vzorka spermy s výberom mobilných a vitálnych spermií.

Potom pokračujte do únie a mimotelovej kultivácie gamét. Technika ICSI je založená na princípe "imitácie" procesu oplodnenia, manipuláciou pod mikroskopickým vedením: oocyt je držaný na mieste pomocou sklenenej pipety a pomocou ihlovej kanyly sa injikuje do cytoplazmy. jedinú spermatozoon.

Produkt tejto operácie sa umiestni na špeciálne platne s kultivačnými médiami, ktoré dávajú bunkám živiny, v inkubátoroch. Táto fáza je veľmi citlivá a prebieha pod prísnou kontrolou biológov a embryológov, ktorí sledujú všetky procesy bunkového delenia, ktoré povedú k tvorbe embrya.

Čo sa týka IVF, 16-18 hodín po inseminácii, dochádza k oplodneniu, tj tvorbe zygoty, kde možno pozorovať dva pronuklei (samce a samičky).

Vývoj embrya a prenos do maternice

Po 48 až 72 hodinách sa vyberú 1 až 3 embryá a prenesú sa do maternice. Vzorka sa zavedie do tenkého plastického katétra a gynekológ ju nasmeruje na koniec maternice. Zavedenie embryí trvá len niekoľko minút a je vo všeobecnosti bezbolestné.

kryokonzervácia

V medziach platných predpisov sa neprenesené embryá zmrazia v tekutom dusíku, a preto sa uskladnia vo vzorke banky. Technika ICSI môže v skutočnosti predvídať použitie gamét alebo novo oplodnených embryí (" čerstvé cykly ") alebo zmrazených konzerv, ktoré sa privádzajú a udržiavajú pri veľmi nízkych teplotách (" cykly rozmrazovania ").

Ak sa tehotenstvo nedosiahne pri prvom pokuse, embryá alebo oocyty, ktoré boli predtým zmrazené, sa môžu použiť na následné liečebné cykly.

Úspešnosť

Technika ICSI je spojená s vysokým percentom oplodnenia s tvorbou embryí (spermatozoon je ušetrený od kríženia cez pellucidnú membránu) a má dobrý úspech v prítomnosti ťažkej mužskej neplodnosti. V prípade azoospermie sa táto technika môže v skutočnosti uskutočniť s použitím gamét prítomných v semenníkoch alebo v epididymis, odkiaľ sa odoberajú aspiráciou alebo mikrochirurgiou (podobnou biopsii). Jedinou podmienkou potrebnou na aplikáciu ICSI je, že spermie sú životne dôležité.

Úspešnosť tehotenstva je tiež dobrá (vo všeobecnosti sa odhaduje na približne 20% na cyklus). Výsledok liečby závisí od kvality embryí prenesených in vitro a od schopnosti maternice ich prijímať.

Riziká a možné komplikácie

Reakcia na rôzne terapeutické protokoly na vyvolanie ovulácie musí byť kontrolovaná (ultrazvukovými vyšetreniami vaječníkov a / alebo hormonálnymi dávkami), aby sa zabránilo syndrómu hyperstimulácie vaječníkov, tj nadmernému dozrievaniu folikulov a produkcii vajec.
Tento stav môže zahŕňať rôzne symptómy, ako napríklad dýchavičnosť, nevoľnosť a zväčšenie vaječníkov, ktoré sú bolestivé a spôsobujú pacientovi nepríjemné pocity; v najzávažnejších prípadoch sa môže vyskytnúť abdominálna distenzia a tvorba krvných zrazenín, čo by mohlo spôsobiť nutnosť hospitalizácie.
Peritoneálne infekcie sú jedným z možných dôsledkov laparoskopických postupov spojených s ICSI technikou, zameraných na nájdenie vaječných buniek.
Okrem toho je potrebné oznámiť väčšiu pravdepodobnosť viacpočetných tehotenstiev, pretože v záujme zvýšenia možnosti vzniku koncepcie počas postupu ICSI možno preniesť niekoľko embryí do maternice. Viacpočetné tehotenstvo prináša riziká pre zdravie matky a detí, u ktorých je pravdepodobnosť, že sa narodia predčasne a budú mať podváhu na konci tehotenstva.