Čo je to antibiogram?
Antibiogram je mikrobiologický test, ktorý sa používa na testovanie citlivosti mikroorganizmu na jeden alebo viac antimikrobiálnych liekov.
Antiogram sa využíva hlavne na hygienickej úrovni a tradične sa vykonáva na vzorkách bakteriálnych kolónií odvodených z jednotiek odobratých hltanovým, uretrálnym, rektálnym alebo vaginálnym výterom, alebo izolovaných z výkalov, vzoriek moču alebo spúta.
Výkonné techniky a antibiotická rezistencia
Antibiogram sa často vykonáva agarovou difúznou metódou, tiež označovanou ako Kirby-Bauerova technika.
Počas procedúry sa z kolónií odoberie vzorka baktérií a vhodne sa usadí na vhodnej pôde, do ktorej sa tiež vložia disky nasiaknuté antibiotikami v známych koncentráciách (podľa terapeutických potrieb). Platňa sa potom umiestni do inkubátora a po vopred určenom časovom období (napr. 18 hodín pri 35 ° C) je možné oceniť relatívne rovnomerný mikrobiálny rast, s viac alebo menej širokými halomi okolo papierových podbradkov. Na základe rozsahu týchto inhibičných oblastí sa hodnotí citlivosť baktérie na každé jednotlivé testované antibiotikum: ak je priemer veľký, mikroorganizmus je citlivý na liečivo (S), zatiaľ čo ak je malý, baktéria má strednú citlivosť (I alebo MS), zatiaľ čo ak je skúmaný bakteriálny druh zanedbateľný alebo dokonca chýba, je rezistentný (R) k lieku. Na presné stanovenie citlivosti baktérií sa meria priemer inhibičných halo v mm, pričom sa porovnajú hodnoty získané so štandardnými hodnotami bakteriálneho kmeňa.
Ako zabrániť antibiotickej rezistencii
Antibiotiká nie sú účinné proti vírusom; Typickými vírusovými infekciami sú prechladnutie, chrípka, laryngitída, bronchitída, záď a väčšina bolestí v hrdle (faryngitída).
Použitie antibiotík, ak nie sú potrebné (napríklad na nachladnutie alebo chrípka), môže viesť k rozvoju rezistencie na antibiotiká (baktérie sú „rezistentné voči antibiotikám“, keď ich antibiotikum nemôže zabiť).
POZNÁMKA: je to baktéria, ktorá je odolná voči antibiotikám, NIE jedincovi. Preto, aj keď ste nikdy nepoužívali antibiotiká, môžu sa u Vás vyvinúť infekcie spôsobené baktériami rezistentnými na antibiotiká.
Aby sa zabránilo vzniku rezistencie na antibiotiká, je nevyhnutné, aby bola liečba predpísaná lekárom. aj keď je dobré zastaviť predčasné antibiotiká.
Keď sa počas antibiogramu spájajú haly susedných diskov, príslušné antibiotiká sa považujú za synergické.
Ako alternatíva k práve opísanej metóde sa môže antibiogram tiež vykonať na kvapalnom médiu, pričom po inkubácii sa vyhodnotí zakalenie zodpovedajúce rôznym stupňom riedenia liečiva (pozri nižšie).
Antibiogram sa teraz stal základným testom vzhľadom na v súčasnosti rozšírený jav fenoménu rezistencie na liečivá. Voľba nesprávneho antibiotika alebo použitie širokospektrálneho liečiva, aby sa zabránilo tomuto postupu, môže v skutočnosti vybrať bakteriálne kmene rezistentné voči účinku toho istého. V článku venovanom tejto téme sme videli, ako bola táto kapacita pôvodne získaná pre spontánne mutácie a následne prenesená na iné baktérie. Nie je preto náhoda, že objav a klinické použitie mnohých antibiotík sú v súlade s výskytom baktérií rezistentných na ich pôsobenie. Veľmi často sa jedná o nevhodné a prehnané použitie týchto liekov, napríklad na liečbu vírusových infekcií, proti ktorým sa ukázali ako úplne zbytočné (jediným možným dôvodom je zabrániť akýmkoľvek bakteriálnym superinfekciám u ohrozených ľudí).
Dva veľmi dôležité parametre odvodené z antibiogramu sú MIC a MBC:
- MIC (minimálna inhibičná koncentrácia; minimálna inhibičná koncentrácia): je to najnižšia koncentrácia skúmanej zlúčeniny potrebná na inhibíciu rastu daného mikroorganizmu.
- MBC (minimálna bakteriálna koncentrácia): je najnižšia koncentrácia skúmanej zlúčeniny, ktorá je potrebná na vyvolanie smrti viac ako 99, 9% danej mikrobiálnej populácie.
Na stanovenie MIC v tuhom médiu pomocou antibiogramu sa predpokladá, že mikrobiálne činidlo difunduje z disku do agaru a vytvára gradient koncentrácie; v dôsledku toho, čím ďalej od disku, tým nižšia koncentrácia liečiva, ktorá progresívne klesá na dosiahnutie kritickej koncentrácie (minimálna približná inhibičná koncentrácia MIC). Za týmto bodom je konfluentný rast, zatiaľ čo v oblasti najbližšej k disku chýba rast.
V antibiograme na kvapalnom médiu sa pripraví séria testovacích skúmaviek obsahujúcich kultivačné médium a zriedené roztoky (v pomere 2) testovaného antibiotika. V každej z týchto skúmaviek sa naočkuje štandardné množstvo skúmaných mikróbov; nasleduje inkubácia a vyšetrenie. Ako sa očakávalo, v prítomnosti zákalu je viditeľný rast baktérií, zatiaľ čo roztok zostáva číry, čo znamená úplnú inhibíciu mikrobiálneho rastu, s dôrazom na optimálnu účinnosť liečiva. V tomto prípade MIC (minimálna inhibičná koncentrácia) predstavuje najvyššie riedenie (tj najnižšiu koncentráciu) antibiotika schopného úplne inhibovať rast mikroorganizmu. MBC (minimálna baktericídna koncentrácia) sa namiesto toho stanovuje pestovaním vzoriek odobratých z kvapalného média v špeciálnom pevnom médiu a vyhodnotením možného rastu baktérií. MIC preto bude zodpovedať koncentrácii antibiotika prítomného v skúmavke, v ktorej je liek zriedenejší a ktorý pri kultúrnom vyšetrení nevykazuje žiadne známky bakteriálnej aktivity (pozri obrázok).
Výsledky antibiogramu sú zverejnené v osobitnej správe, kde sú uvedené použité antibiotiká a súvisiace MMC; niekedy sú tiež uvedené asociácie antibiotík, ktoré môžu byť použité a stupeň rezistencie mikroorganizmov.
Tradičné metódy vykonávania antibiogramu, veľmi užitočné pre vzdelávacie účely, sa neustále vyvíjajú. V súčasnosti sú napríklad dostupné automatizované komerčné systémy, zatiaľ čo papierové vankúšiky s bibulami môžu byť nahradené pásmi obsahujúcimi prírastkové dávky antibiotika, vhodne označené na samotnom prúžku (E-test na antibiogram).
