všeobecnosť
Elektroforéza je technika používaná v laboratórnej analýze, ktorá využíva molekulovú hmotnosť a elektrický náboj proteínov na hodnotenie ich množstva a kvality . Táto skúška umožňuje separáciu proteínov do piatich frakcií : albumínu, alfa 1 globulínu, alfa 2 globulínu, beta globulínu a gama globulínu . Zmena vzťahu medzi týmito typmi proteínov indikuje niektoré patologické stavy. Elektroforéza sa môže uskutočňovať na vzorkách krvného séra, moči alebo iných biologických tekutinách, ako je tekutina (cerebrospinálna tekutina).
Tento proteín sa tiež nazýva proteínová elektroforéza alebo protidogramma, tento test sa vykonáva veľmi konkrétnou metódou: na vzorku sa aplikuje elektrické pole, vďaka ktorému sa proteíny „zoskupujú“ podľa typu. V skutočnosti každý z proteínov, ktoré analyzujú elektroforézu, má svoju vlastnú molekulovú hmotnosť a elektrický náboj, ktorý im umožňuje odpovedať na napätie, ktoré je charakteristické jednosmerným prúdom. Za normálnych podmienok napríklad prvý očakávaný vrchol - vyšší a užší - v elektroforetickej dráhe zodpovedá albumínu .
Praktickejšie, elektroforéza je analýza používaná na určenie:
- Prítomnosť abnormálnych proteínov;
- Absencia normálnych proteínov;
- Ak je skupina proteínov prítomná v menších alebo väčších množstvách ako je norma.
Lekár môže požadovať elektroforézu ako súčasť kontrolných vyšetrení (rutinná analýza) alebo diagnostického postupu, to znamená v prípade, keď iné laboratórne analýzy ukázali zmeny a je potrebné klinické podozrenie prehĺbiť alebo potvrdiť.
čo
Elektroforéza je laboratórna analýza, ktorá poskytuje dôležité informácie o množstve proteínov prítomných v krvnom sére alebo v iných biologických vzorkách a pre každú frakciu odhaľuje, či existujú nejaké anomálie z hľadiska kvality. To je možné použitím elektrického poľa, využívajúceho elektroforetickú mobilitu proteínov; migrácia týchto makromolekúl je ovplyvnená ich hmotnosťou, veľkosťou, nábojom a tvarom.
Test umožňuje najmä separáciu proteínov do piatich skupín : albumín, alfa 1 globulín, alfa 2, beta a gama .
Výsledok elektroforézy umožňuje skúmať koncentráciu týchto parametrov: počas niektorých patologických stavov sa pozoruje možná zmena vzťahu medzi týmito skupinami proteínov. Preto je elektroforéza užitočná pri potvrdení diagnózy a po zistení ochorenia pri sledovaní pacienta v následnom sledovaní .
Elektroforéza: na ktorých vzorkách možno vykonať?
Biologické vzorky, na ktoré sa môže použiť elektroforéza, sú hlavne:
- Sérum : elektroforéza seroproteínu alebo elektroforéza sérových proteínov;
- Moč : elektroforéza v moči alebo elektroforéza proteínov v moči;
- Likér (cerebrospinálna tekutina) : elektroforéza proteínov likéru (poznámka: tekutina je tekutina, ktorá preniká a chráni mozog, miechu, lebečné nervy a miechové korene).
Elektroforéza: čo sa meria
Plazmatické proteíny sú veľmi dôležitými ukazovateľmi: akékoľvek zmeny v ich koncentráciách môžu signalizovať prítomnosť mnohých chorôb.
Pri elektroforéze je možné vo vzorke oddeliť nasledujúce proteíny:
- Albumín ;
- Alfa 1 globulíny ;
- Alfa2 globulíny ;
- Beta globulíny ;
- Gama globulíny .
V súčasnosti mnoho laboratórií vykonáva 6-pásmovú separáciu, tj separáciu beta globulínov v dvoch frakciách:
- Beta 1 globulíny ;
- Beta 2 globulíny .
Vedeli ste, že ...
V laboratóriu je elektroforéza jednou z najpoužívanejších techník na analýzu kvalitatívneho a kvantitatívneho zloženia proteínov. Táto separačná metóda je založená na odlišnej rýchlosti migrácie elektricky nabitých častíc cez roztok a nosné médium pod vplyvom elektrického poľa .
Albumín je najhojnejším proteínom v sére a jedným z najdôležitejších v tele. Toto je syntetizované v pečeni a je obsiahnuté predovšetkým v intersticiálnych kvapalinách a v plazme, kde samo o sebe predstavuje približne polovicu cirkulujúcich proteínov. Albumín vykonáva rôzne funkcie, vrátane správneho riadenia osmotického tlaku a transportu látok, ako je bilirubín.
Globulíny alfa 1 a 2 primárne vykonávajú transport lipidov, tukov a hormónov. Beta globulíny tiež nesú látky prítomné v krvi; Medzi najznámejšie proteíny tejto skupiny patrí transferín (používaný na transport železa) a beta-2 mikroglobulín. Gama globulíny majú namiesto toho hlavne protilátkovú funkciu.
Niektoré plazmatické proteíny sa produkujú v pečeni (ako je albumín), zatiaľ čo iné sa uvoľňujú do krvi z buniek, ktoré patria do imunitného systému (gama globulín).
Prečítajte si viac: Plazmové proteíny - funkcie a funkcie »Elektroforéza: základný princíp
Úvod : vo všeobecnosti je elektroforézou separačná metóda založená na odlišnej rýchlosti migrácie elektricky nabitých častíc, cez roztok a porézne a inertné nosné médium (ako je papier, agarózový gél alebo acetátový list celulózy), pod impulzom elektrického poľa. Mnohé molekuly biologického záujmu (aminokyseliny, peptidy, proteíny, DNA a RNA) majú vo svojej štruktúre ionizovateľné skupiny, preto pri vhodnej hodnote pH sú tieto prítomné v roztoku ako elektricky nabité druhy. Pod vplyvom elektrického poľa tieto nabité molekuly migrujú smerom ku katóde alebo anóde v závislosti od toho, či majú kladný náboj ( katión ) alebo záporný náboj ( anióny ).
Elektroforéza je metóda, ktorá umožňuje separáciu makromolekúl a najmä proteínov na základe:
- Molekulová hmotnosť ;
- Elektrický náboj .
Pri umiestnení do základného prostredia sa proteíny chovajú ako kyseliny: skupina COOH rôznych aminokyselín, ktoré tvoria štruktúru makromolekuly, disociuje na COO- (záporné častice) a H + (pozitívny ión). Proteíny sú teda zaťažené ako celok v negatívnom zmysle a ich elektroforetická pohyblivosť ide od negatívneho pólu (katóda) k pozitívnemu, čo je smerom k anóde (pretože záporné náboje presahujú kladné náboje).
Pri návrate k vyšetreniu sa pacientova vzorka - obsahujúca zmes proteínov (napr. Sérových proteínov) - umiestni na elektroforetický prúžok, tj na podporu migrácie .
Oddelenie v piatich pásmach sa získa použitím elektrického poľa, vytvoreného jednosmerným prúdom, ktoré umožňuje migráciu rôznych proteínových frakcií na základe ich hmotnosti a ich elektrického náboja.
Výsledok - nazývaný ELEKTROFORETICKÁ TRACK - sa skladá z rôznych vrcholov a kriviek, na ktoré zodpovedajú proteínové frakcie, rozdelené podľa typu a množstva, prítomného v skúmanej kvapaline:
- Zvyčajne je prvý vrchol, vyšší a užší, vrcholom ALBUMINY ;
- Ďalej pozorujeme vrcholy GLOBULÍNOV oveľa nižšie ako albumín.
Zvýšenie alebo zníženie amplitúdy a intenzity píkov, ktoré sa tvoria v dráhe, indikujú väčšiu alebo menšiu prítomnosť proteínov v každej kategórii.
Vedeli ste, že ...
Transtyretín bol predtým nazývaný prealbumín kvôli jeho väčšej elektroforetickej mobilite v porovnaní s albumínom, čo mu umožňuje migrovať do viac anodickej polohy.
Ďalšie informácie: Prealbumin - Čo je to »Prečo to beží
Čo je to elektroforéza?
Elektroforéza sa používa na diagnostiku alebo monitorovanie chorôb, ktoré majú medzi svojimi klinickými nálezmi zmenu koncentrácie proteínov v plazme, moči alebo iných biologických vzorkách.
Táto anomália sa môže vyskytnúť napríklad v prípade:
- Choroby pečene a obličiek ;
- Infekcie alebo zápaly ;
- Mnohopočetný myelóm ;
- Skleróza multiplex .
Elektroforéza: kedy je vyšetrenie predpísané?
ÚVOD : v kontrolných paneloch je zvyčajne obsiahnuté celkové množstvo bielkovín v krvi - proteínémia - a albumín - albuminémia, preto sa často používa pri hodnotení zdravotného stavu osoby . V rutinnej analýze sa zmena týchto parametrov môže považovať za BELL ALARMU a môže vyvolať prehĺbenie klinického obrazu, najmä ak pacient vykazuje konkrétnu symptomatológiu.
Elektroforéza PROTEÍN V SERUME môže byť predpísaná:
- V prípade, že iné laboratórne testy poskytujú abnormálny výsledok, pokiaľ ide o neprítomnosť alebo menšie a väčšie množstvo plazmatických proteínov vzhľadom na normu;
- Keď prítomnosť:
- Prebieha zápal;
- infekcie;
- Autoimunitné ochorenie;
- nefropatia;
- ochorenie pečene;
- Choroby charakterizované produkciou monoklonálnej zložky, to znamená protilátok s rovnakou chemickou štruktúrou, ako sú: \ t
- Mnohopočetný myelóm a jeho varianty;
- Waldenströmova makroglobulinémia;
- Amyloidóza.
Keď je v moči vysoká koncentrácia bielkovín, namiesto toho môže lekár požiadať o vykonanie elektroforézy močových proteínov. Vyšetrenie umožňuje určiť zdroj zmeny, potvrdiť alebo podporiť diagnózu.
Elektroforéza PROTEÍN DEL LIKVOR môže byť predpísaná pri podozrení na diagnózu sklerózy multiplex . V tomto prípade je určený elektroforetický obrazec charakteristický, pretože zdôrazňuje prítomnosť takzvaných oligoklonálnych pásov, ktoré nie sú normálne prítomné v elektroforéze sérových proteínov.
Akonáhle je ochorenie diagnostikované, môže sa v pravidelných intervaloch vykonávať elektroforéza na:
- Sledujte chorobu v priebehu času, potom sledujte jej priebeh (sledovanie);
- Skontrolujte účinnosť terapeutického protokolu .
Normálne hodnoty
U dospelého v dobrom zdravotnom stave je normálna koncentrácia celkového proteínu v krvi 6, 4-8, 3 gramov na deciliter plazmy (g / dl).
Albumín (seroproteínová elektroforéza)
Albumín predstavuje 59-69% celkových plazmatických proteínov.
- Referenčná hodnota Albumín: 3, 6-4, 9 g / dl
Alfa 1 globulín
Alfa-1 globulíny tvoria 2, 0 až 3, 5% celkových plazmatických proteínov.
- Referenčná hodnota alfa 1 globulín : 0, 2-0, 4 g / dl
Alfa 2 globulíny
Alfa-2 globulíny predstavujú 6 až 11% celkových plazmatických proteínov.
- Referenčná hodnota alfa 2 globulíny : 0, 4-0, 8 g / dl
Beta globulíny
Beta globulíny tvoria 6-12% celkových plazmatických proteínov.
- Referenčná hodnota beta globulínu: 0, 6-1 g / dl
Gama globulíny
Gama globulíny tvoria 9-20% celkových plazmatických proteínov.
- Referenčná hodnota Gama globulín : 0, 9-1, 4 g / dl
Poznámka : referenčný interval skúšky sa môže mierne líšiť v závislosti od veku, pohlavia a prístrojového vybavenia použitého v analytickom laboratóriu. Z tohto dôvodu je vhodnejšie konzultovať rozsahy uvedené priamo v prehľade. Treba tiež pripomenúť, že výsledky analýz musia byť hodnotené ako celok praktickým lekárom, ktorý pozná anamnézu pacienta.
Vysoké hodnoty - príčiny
Sérová elektroforéza: čo spôsobuje zvýšenie hodnôt?
bielkovina
Zistenie zvýšenia sérového albumínu pomocou elektroforézy je časté počas chorobných stavov, ktoré odoberajú vodu z tela a vedú k vzniku dehydratácie, vrátane:
- Pretrvávajúce zvracanie a hnačka;
- Rozsiahle popáleniny;
- Nadmerné potenie;
- Addisonova choroba;
- Diabetická kóma.
Pri elektroforetickom sledovaní môže byť koncentrácia albumínu vyššia ako norma indikujúca:
- Sarkoidóza (systémové zápalové ochorenie);
- Buergerova choroba alebo tromboangioit obliterans (ochorenie postihujúce cievy a artérie).
ALFA 1 GLOBULINE
Alfa 1 globulíny sa zvyšujú v nasledujúcich prípadoch:
- Prebieha zápalový proces alebo infekcia;
- Srdcový infarkt;
- Užívanie antikoncepčnej pilulky;
- Tehotenstvo.
ALFA 2 GLOBULINE
Vysoké hodnoty alfa 2 globulínov môžu indikovať prítomnosť:
- Ochorenie obličiek;
- Zápal alebo prebiehajúca infekcia;
- Srdcový infarkt;
- diabetes;
- Downov syndróm;
- Niektoré zhubné nádory.
BETA GLOBULINE
Zvýšenie beta globulínov v elektroforetickej stope indikuje:
- Vysoký cholesterol v krvi (hypercholesterolémia);
- Anémia s nedostatkom železa;
- Niektoré prípady mnohopočetného myelómu;
- Tehotenstvo.
GLOBULINE RANGE
Pri elektroforéze môže byť zvýšenie polyklonálnych gama globulínov spojené s:
- Chronické zápalové ochorenia;
- Niektoré ochorenia imunitného systému;
- Reumatoidná artritída;
- Systémový lupus erythematosus;
- Chronické ochorenia pečene (ako je hepatitída a cirhóza);
- Akútne a chronické infekcie.
Vysoké hodnoty monoklonálnych gama globulínov môžu namiesto toho naznačovať prítomnosť:
- Niektoré nádory;
- Mnohopočetný myelóm;
- lymfóm;
- Waldenströmova makroglobulinémia.
Na identifikáciu toho, ktorý gama globulín je prítomný v monoklonálnom pásme v elektroforetickom vzore, je možné pokračovať s imunofixáciou.
Elektroforéza v moči
Významné zvýšenie proteínov v moči pomocou elektroforézy môže indikovať poruchu glomerulov a renálnych tubulov .
Elektroforéza v kvapaline
Ak elektroforéza vedie k tomu, že bielkoviny, ktoré nie sú normálne prítomné v mozgovomiechovom moku alebo sa zvyšujú, môže dôjsť k zápalu, infekcii alebo iným ochoreniam nervového systému .
Zistenie oligoklonálnych pásov v elektroforetickom sledovaní je indikátorom roztrúsenej sklerózy .
Nízke hodnoty - príčiny
Sérová elektroforéza: čo spôsobuje redukciu proteínov?
bielkovina
Redukcia albumínu pri elektroforetickom sledovaní môže byť spôsobená všetkými týmito stavmi charakterizovanými:
- Podvýživa (najmä: nedostatok proteínov v dôsledku zníženého príjmu potravy);
- Malabsorpcia sekundárna k: enteropatiam, celiakii, Crohnovej chorobe, intolerancii proteínov;
- Zvýšený katabolizmus : ťažký zápal, horúčkovité stavy, kachexia, neoplazmy, hypertyreóza, hyperkortizolizmus atď.
Vrcholy albumínu tiež znižujú po patológiách, ktoré ovplyvňujú pečeň (chýba schopnosť syntézy) a obličkách (zvyšuje elimináciu).
Koncentrácia albumínu detegovaná elektroforézou v sére sa môže znížiť najmä vtedy, keď sú stanovené: \ t
- Cirhóza pečene (najčastejšia príčina);
- Akútna a chronická hepatitída;
- Genetické anomálie (syntéza chybných albumínov);
- Ochorenie obličiek (najmä nefrotický syndróm a glomerulonefritída).
Zistenie nízkeho albumínu s elektroforézou sa pozoruje aj v gravidite pre:
- Hormonálne modifikácie, ktoré menia vaskulárnu permeabilitu a funkčnosť mnohých orgánov tehotnej ženy;
- Zvýšené používanie proteínov plodom.
ALFA 1 GLOBULINE
Alfa 1 globulíny sa redukujú na elektroforézu v prítomnosti:
- Závažné ochorenie pečene;
- Vrodený emfyzém;
- Ochorenia obličiek.
ALFA 2 GLOBULINE
Nízke hodnoty alfa 2 globulínov môžu indikovať:
- podvýživa;
- Závažné ochorenie pečene;
- Hemolýza.
BETA GLOBULINE
Znížená koncentrácia beta globulínov v stope elektroforézy môže naznačovať:
- podvýživa;
- Cirhóza pečene.
GLOBULINE RANGE
Nízke hodnoty gama globulínu môžu indikovať prítomnosť rôznych ochorení imunitného systému.
Elektroforéza v moči
Normálne sa pri elektroforéze zistí malá koncentrácia proteínu v moči. Preto tento výsledok nenaznačuje prítomnosť určitých chorôb.
Elektroforéza v kvapaline
Za normálnych podmienok je koncentrácia celkových proteínov v roztoku veľmi nízka. Zistenie hodnôt redukovaných na elektroforézu preto nekoreluje s určitým patologickým významom.
Ako sa vykonáva
Elektroforéza: z čoho pozostáva skúška
- Elektroforéza srvátky (krvný test) : na získanie elektroforetického sledovania v sére je potrebné podstúpiť jednoduchú vzorku krvi zo žily ramena. Následne sa sérum získa oddelením frakcie obsahujúcej bunky od kvapalnej.
- Elektroforéza proteínov v moči (analýza moču) : je potrebné odobrať malé množstvo moču v špeciálnej sterilnej nádobe. Na základe indikácií lekára a laboratória možno vzorku odobrať bez presného načasovania ( náhodne ) alebo do 24 hodín .
- Elektroforéza v kvapaline (analýza mozgovomiechového moku) : vyžaduje odobratie malého množstva tekutiny prostredníctvom vloženia ihly do chrbtice miechy ( lumbálna punkcia ).
príprava
Elektroforéza: je potrebná príprava?
- Pred odberom krvi môžu niektoré laboratóriá vyžadovať, aby ste sledovali rýchlosť aspoň 10-12 hodín. Počas tejto doby je povolené malé množstvo vody.
- Elektroforézu možno vykonať na moči odobratej v určitom čase dňa (náhodne) alebo počas 24 hodín, takže je potrebné vopred získať vhodné sterilné nádoby.
- Čo sa týka kvapalnej elektroforézy, nevyžaduje sa žiadna špeciálna príprava.
Čo môže zmeniť výsledok skúšky?
Niektoré lieky môžu ovplyvniť výsledok elektroforézy, preto sa odporúča hlásiť lekárovi každú prebiehajúcu liečbu. Lieky, ktoré môžu zmeniť klinický nález, zahŕňajú orálnu antikoncepciu, anabolické steroidy, androgény, rastové hormóny, inzulín a antibiotiká.
Medzi ďalšie faktory, ktoré môžu ovplyvniť skúšku, patria:
- Hyperlipidémia (prítomnosť mnohých tukov v krvi);
- Podávanie veľkých množstiev intravenóznych tekutín;
- Vegetariánska strava;
- Hemolyzované vzorky (ak sa vykonáva elektroforéza na sére).
Interpretácia výsledkov
Elektroforetická dráha sa hodnotí v kombinácii s výsledkami iných analýz a poskytuje informácie o zdravotnom stave pacienta.
Zníženie alebo zvýšenie v porovnaní so štandardom proteínov v sérovej, močovej alebo kvapalnej elektroforéze ukazuje prítomnosť rôznych chorôb, identifikovaných na základe parametra ovplyvneného zmenou.
Vždy treba mať na pamäti, že referenčné hodnoty sa môžu meniť z jedného laboratória na druhé. Preto je nevyhnutné konzultovať s lekárom primárnej starostlivosti alebo s referenčným špecialistom na čítanie a interpretáciu výsledkov.
